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      大鼠血管動蛋白(AMOT)elisa檢測試劑盒操作步驟

      日期:2021-12-21瀏覽:889次

      大鼠血管動蛋白(AMOT)elisa檢測試劑盒操作步驟:

      1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

      2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

      3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

      4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

      7.溫育:操作同 3。

      8.洗滌:操作同 5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

      10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。

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