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      EHA101 電擊感受態細胞操作規程

      日期:2022-06-15瀏覽:856次

      EHA101 電擊感受態細胞操作規程:

      一.培養基及培養凍存條件準備:

      1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

      2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

      3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

      二.細胞處理:

      1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

      2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

      對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

      方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

      小鼠血小板生成素(mouse TPO)

      小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(mouse TRAIL/APO 2L)

      小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(mouse TRAIL R1)

      小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)

      小鼠血栓調節蛋白(mouse TM)

      小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)

      小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)

      小鼠血管細胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)

      小鼠血管內皮生長因子(mouse VEGF)

      小鼠血管內皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)

      小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)

      小鼠血管內皮細胞生長因子D(mouse VEGF-D)

      小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)

      小鼠血管活性腸肽(mouse VIP)

      小鼠血管性血友病因子(mouse VWF)

      小鼠血管內皮生長因子受體-2(mouse VEGF R2)

      小鼠軟骨糖蛋白39(mouse YKL-40)


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