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      基礎信息Product information
      產品名稱:

      鴨胚成纖維細胞

      產品簡介:

      鴨胚成纖維細胞公司正在出售的產品:CRYM蛋白抗體 FATE1蛋白抗體 Mono-Mac-6人急性單核白血病細胞 癌基因蛋白抑瘤素M抗體 CCD-13Lu人肺成纖維細胞 FAM133B蛋白抗體 PC-9人非小細胞肺癌細胞 大鼠骨髓來源巨噬細胞

      產品型號:

      廠商性質:經銷商

      訪問量:1246

      更新時間:2024-11-07

      產品特性Product characteristics

      鴨胚成纖維細胞

      鴨胚成纖維細胞

      商品屬性:

      組織來源

      產品規格

      細胞形態

      貨號

      胚胎

      5×105cells/T25細胞培養瓶

      成纖維細胞樣

      YS-01X8550

      細胞簡介:

      鴨胚成纖維分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞,能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

      原代細胞的培養條件:

        一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

        1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

        2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

        3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;

        4、 胎牛血清濃度為10%-80%

        5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

        6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

        7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

        8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

        二、懸浮細胞培養

        1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

        2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

        3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

        4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

        5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

        6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

      方法簡介:

      實驗室分離的鴨胚成纖維采用消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      質量檢測:

      實驗室分離的鴨胚成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      培養信息:

      培養基:含FBSbFGFInsulinPenicillin、Streptomycin

      換液頻率:每2-3天換液一次

      生長特性:貼壁

      細胞形態:成纖維細胞樣

      傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內狀態佳

      消化液:0.25%

      培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

      鴨胚成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

      鴨胚成纖維細胞

      細胞傳代及凍存:

      細胞傳代步驟細胞凍存步驟
      如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

      原代細胞的培養方法一般有以下4種:

        ① 組織塊培養法

        組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

        ② 消化培養法

       ?、?懸浮細胞培養法

        對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

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        器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

      鴨胚成纖維細胞


      公司正在出售的產品:

      樹突狀細胞相關C型凝集素-1   英文名稱:   Human Dendritic cell Associated C type Lectin 1   英文縮寫:   Dectin 1

      二氫二醇脫氫酶   英文名稱:   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   英文縮寫:   DDH2

      多巴胺   英文名稱:   Human Dopamine   英文縮寫:   DPN

      強啡肽   英文名稱:   Human Dynorphin   英文縮寫:   DYN

      FITC標記人CD11a單克隆抗體

      核受體相互作用蛋白3抗體

      MME重組大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

      DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原

      PRDX2重組人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein

      IgG2 Protein Human 重組人 Ig僀?僀

      DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原

      IgG2 Protein Human 重組人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)

      MME重組大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

      CD36 Protein Mouse 重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 標簽)

      PRDX2重組人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein

      豚鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 ,英文名: IGF1 ELISA Kit

      Human Mycoplasma pneumoniae aibody (MP-Ab) ELISA Kit 人肺支原體抗體(MP-Ab)試劑盒

      rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 兔子基質金屬蛋白酶9(MMP-9)pcr檢測試劑盒分裝

      CLIAKitforBcl-2(MouseB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKIT小鼠B細胞淋巴瘤因子2

      纖維蛋白溶酶(PLASMIN)活性熒光定量試劑盒20

      rabbitCoicosterone,COELISAKit兔子皮質同/腎上腺同(CO)試劑盒規格:96T/48T

      鴨胚成纖維細胞大鼠內脂素(VF)試劑盒 ,英文名: VF ELISA Kit

      Monkey ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猴α干擾素(IFN-α)試劑盒

      Ratcoagulationfactorrelatedaigen,F-AgELISAKit 大鼠Ⅷ相關抗原(F-Ag)pcr檢測試劑盒分裝

      CLIAKitforGlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI

      細胞非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20

      RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒規格:96T/48T


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